应当对新形成的水疱活检,如果有可能,应完整取下水疱。如果水疱太大,应当在现有水疱的边缘取活检样本,注意不要损伤该组织,从而使得在采样过程中表皮不与真皮分离。在无大疱的前驱期,或者在非典型病例中,光学显微镜检查结果的特异性较低,只能见到嗜酸性海绵样水肿和局灶性(如果有)表皮下裂隙。如果患者有新形成的水疱,但初次检查没有得到特征性结果,可以复查。[Figure caption and citation for the preceding image starts]: 光学显微镜检查:表皮下水疱由 Vesna Petronic-Rosic 医生提供的资料 [Citation ends].
[Figure caption and citation for the preceding image starts]: 水疱腔内存在纤维蛋白网络,而真皮浸润物含有许多嗜酸性粒细胞由 Vesna Petronic-Rosic 医生提供的资料 [Citation ends].
[Figure caption and citation for the preceding image starts]: 水疱腔内存在纤维蛋白和嗜酸性粒细胞由 Vesna Petronic-Rosic 医生提供的资料 [Citation ends].
表皮下水疱,伴有真皮炎症细胞浸润物,富含嗜酸性粒细胞
使用直接免疫荧光法检查皮肤活检标本是现有的最佳检查。通常应对与水疱相邻的正常皮肤进行活检。需要将标本速冻,或者置于 Michel 培养基中,然后送到相应的实验室,实施免疫病理学检测。对标本处理不恰当,可能导致假阴性结果。然而,如果得到真阴性结果,需要额外的检测,以进一步明确诊断。应当通过间接免疫荧光检测确认阳性结果。[Figure caption and citation for the preceding image starts]: 基底膜区的 IgG 条带由 Vesna Petronic-Rosic 医生提供的资料 [Citation ends].
沿着基底膜区有 IgG 和/或 C3(罕见情况下,还有其他 Ig 类别)线状沉积
由专门的实验室对血清实施间接免疫荧光检测,测定针对大疱性类天疱疮抗原的抗体。 如果直接免疫荧光结果为阳性,应当实施这项检测。
在多达 96% 的患者中,检测结果为阳性。[27] 既往的免疫抑制治疗可能导致滴度较低或为阴性,因而不与疾病的临床活动度相关。
针对大疱性类天疱疮抗原的抗体滴度阳性
已经发现 ELISA 对于检测特异性大疱性类天疱疮抗原具有高度特异性和敏感性。[26] 如果直接和间接免疫荧光检测没有得到特征性诊断信息,应当申请这项检测。 用于检测大疱性类天疱疮抗原特异性 IgG 自身抗体的 ELISA 试剂盒已有市售,但只有少数医疗中心提供这项服务。
测定大疱性类天疱疮抗原的特定区域(例如 BP180 的 NC16A 域)
免疫印迹法的敏感性不固定。 在 75% 的患者中,与 BP230 抗原发生反应,而在 50% 的患者中,与 BP180 抗原发生反应。[28] 免疫印迹法或蛋白质印迹法表明,患者血清的 IgG 与从健康人皮肤提取的蛋白质有反应。
血清中 IgG 的反应性
免疫沉淀反应可检测到 BP230 和 BP180 特异性自身抗体。 与免疫印迹法不同,使用天然蛋白而不是变性蛋白实施免疫沉淀反应,敏感度更高。
与 BP230 和 BP180 有反应
FOAM 技术不是常规可用的技术。 这种技术有助于鉴别诊断获得性表皮下大疱性皮肤病、大疱性类天疱疮和获得性大疱性表皮松解症,对在表皮基底膜区存在 IgG 沉积物的皮肤进行超微结构识别,是正确诊断的关键。[29]
大疱性类天疱疮患者皮损周围皮肤的数字化多色 FOAM 影像可清晰显示,绿染的透明板 IgG 沉积物条带和红染的 VII 型胶原条带。
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